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膠體金快速測(cè)定儀的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2024-09-03 16:35:14來源:深芬儀器

  膠體金(colloidal gold),又稱金溶膠(gold solution),是指分散相粒子直徑在l—150nm之間的金溶膠,屬于多相不均勻體系,顏色呈桔紅色到紫紅色。膠體金可以作為標(biāo)記物用于免疫組織化學(xué),近10多年來膠體金標(biāo)記已經(jīng)發(fā)展為一項(xiàng)重要的免疫標(biāo)記技術(shù)。膠體金免疫分析在藥物檢測(cè)、生物醫(yī)學(xué)等許多領(lǐng)域的研究已經(jīng)得到發(fā)展,并越來越受到相關(guān)研究領(lǐng)域的重視。

膠體金的應(yīng)用:

1、膠體金在電鏡水平的應(yīng)用。膠體金應(yīng)用電鏡水平的研究最早,發(fā)展最快,應(yīng)用最廣泛。其最大優(yōu)點(diǎn)是可以通過應(yīng)用不同大小的顆?;蚪Y(jié)合酶標(biāo)進(jìn)行雙重或多重標(biāo)記。直徑為3~15nm 膠體金均可用作電鏡水平的標(biāo)記物。3~15nm 的膠體金多用于單一抗原顆粒的檢測(cè),而直徑15nm 多用于檢測(cè)量較多的感染細(xì)胞。

膠體金用于電鏡水平的研究,主要包括:①細(xì)胞懸液或單層培養(yǎng)中細(xì)胞表面抗原的觀察。②單層培養(yǎng)中細(xì)胞內(nèi)抗原的檢測(cè)。③組織抗原的檢測(cè)。金標(biāo)記在電鏡水平的應(yīng)用,主要方法包括:包埋前染色、包埋后染色、免疫負(fù)染色、雙標(biāo)記技術(shù)和原位雜交技術(shù)等。實(shí)驗(yàn)證明,該法樣本用量少、檢測(cè)速度快、對(duì)比明顯、操作簡(jiǎn)單、敏感性和特異性高,既可用于抗原檢測(cè),也可用于抗體檢測(cè),因此,可同時(shí)適用于科研和診斷。

2、膠體金在光鏡水平的應(yīng)用。膠體金同樣可用做光鏡水平的標(biāo)記物,取代傳統(tǒng)的熒光素、酶等。各種細(xì)胞涂片、切片均可應(yīng)用。主要用于:①用單克窿抗體或抗血清檢測(cè)細(xì)胞懸液或培養(yǎng)的單層細(xì)胞的膜表面抗原。②檢測(cè)培養(yǎng)的單層細(xì)胞胞內(nèi)抗原,③組織中或亞薄切片中抗原的檢測(cè)。 膠體金用于光鏡水平的研究,可以彌補(bǔ)其它標(biāo)記物不可避免的本底過高和內(nèi)部酶活性干擾等缺點(diǎn)。

3、膠體金在流式細(xì)胞儀中的應(yīng)用。應(yīng)用熒光素標(biāo)記的抗體,通過流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)分析細(xì)胞表面抗原,是免疫學(xué)研究中的重要技術(shù)之一。但由于不同熒光素的光譜相互重疊,區(qū)分不同的標(biāo)記困難,因此必須尋找一種非熒光素標(biāo)記物,用于流式細(xì)胞計(jì)數(shù)。這樣可以同時(shí)進(jìn)行幾種標(biāo)記。該標(biāo)記物必須能夠改變散射角,膠體金可以明顯地改變紅激光散射角,因而可以作為流式細(xì)胞儀的標(biāo)記物之一。

4、凝集試驗(yàn):?jiǎn)畏稚⒌拿庖呓鹑苣z呈清澈透明的溶液,其顏色隨溶膠顆粒大小而變化,當(dāng)與相應(yīng)抗原或抗體發(fā)生專一性反應(yīng)后出現(xiàn)凝聚,溶膠顆粒極度增大,光散射隨之發(fā)生變化,顆粒也會(huì)沉降,溶液的顏色變淡甚至變成無(wú)色,這一原理可定性或定量地應(yīng)用于免疫反應(yīng)。

5、免疫印跡技術(shù)(immunoblotting):免疫印跡是一種較新的免疫化學(xué)技術(shù)。用聚丙烯酰胺凝膠電泳將蛋白質(zhì)分離,得到的區(qū)帶轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜,然后用酶免疫法(或免疫熒光、RIA)進(jìn)行定量。免疫膠體金也可用于該法的定量。轉(zhuǎn)移后的硝酸纖維素膜與某特異性的抗體保溫后,再與經(jīng)葡萄球菌A蛋白致敏的膠體金溫育,徹底洗去多余的膠體金,根據(jù)膜上膠體金顆粒顏色深淺可測(cè)知樣品中的特異性抗原。

6、膠體金在肉眼水平的應(yīng)用。膠體金取代傳統(tǒng)三大標(biāo)記物,用于肉眼水平的免疫檢測(cè)中。除了膠體金本身具有的特點(diǎn)外,還有以下優(yōu)點(diǎn):①試劑和樣本用量極小,樣本量可低至1~2ul;②不需γ-計(jì)數(shù)器、熒光顯微鏡、酶標(biāo)檢測(cè)儀等貴重儀器,更適于現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用; ③沒有諸如放射性同位素、鄰苯二胺等有害物質(zhì)參與;④實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以長(zhǎng)期保存;⑤時(shí)間大大縮短,提高了檢測(cè)速度。金標(biāo)過程中,無(wú)共價(jià)鍵形成,是一定離子濃度下的物理吸附。因此幾乎所有的大分子物質(zhì)都可被金標(biāo)記,標(biāo)記后大分子物質(zhì)活性不發(fā)生改變。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,膠體金的敏感性可達(dá)到 ELISA的水平。而結(jié)合銀染色時(shí),檢測(cè)的敏感性更大大提高。

深芬儀器膠體金快速分析儀介紹:

  CSY-JA膠體金快速測(cè)定儀應(yīng)用膠體金免疫層析技術(shù)的原理,通過反射光譜法測(cè)試CT線強(qiáng)弱程度可以檢測(cè)生化卡、金標(biāo)卡及液態(tài)滴定模塊制成的獸藥殘留、瘦肉精、抗生素殘留、動(dòng)物疫病、重金屬、農(nóng)藥殘留、色素、轉(zhuǎn)基因、動(dòng)物疫病、水質(zhì)安全等項(xiàng)目。